原位雜交檢測實驗
背景介紹：
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。
原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件：組織、細胞或染色體的固定，具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)，有與探針結(jié)合的標記物。
案例展示
原位雜交送樣要求：
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樣品類型 |
樣品要求 |
保存條件 |
運輸條件 |
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新鮮組織 |
新鮮取材組織，PBS清洗干凈，-80℃保存； |
-80℃ |
干冰 |
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固定組織 |
盡量保持組織的原有形態(tài)，標注固定液類型和固定時間； |
常溫 |
常溫 |
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組織蠟塊 |
組織由標準的石蠟盒包埋，盡量提供半年內(nèi)的包埋蠟塊； |
4℃ |
冰袋 |
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組織切片 |
防脫載玻片進行撈片，注明切片厚度，烤片溫度和時間； |
4℃ |
冰袋 |
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細胞爬片 |
使用孔板專用的爬片，PBS清洗2-3次，封口膜封板，備注分組信息； |
常溫 |
常溫 |
